Oriola Blog

Проба Селиванова на фруктозу. Реактив Селиванова: 0,5 % раствор резорцина в 20 % НС1.

Техника: к 1 мл мочи добавляют 0,5 мл указанного реактива, смешивают и ставят в кипящую водяную баню на 1 мин. При наличии в моче фруктозы после кипячения с резорцином появляется вишнево-красное окрашивание. Однако, если кипятить смесь более длительно, подобное окрашивание может дать и присутствие глю­козы.

Пробу используют для выявления наследственной фруктоземии

Проба Эрлиха на уробилиноген и порфобилиноген. Реактив: 2 % раствор диметиламинобензоальдегида в 2 н. НС1.

Техника: к5 мл мочи добавляют 1 мл реактива. При наличии уробилиногена и порфобилиногена через 10 мин появляется розовое окрашивание.

Пробу используют при подозрении на наследственное нарушение обмена билирубина.

Проба с нингидрином на гипераминоацидурию. Реактивы: раствор 1 г нингидрина в 500 мл 95 % этанола, который хранят в темной стеклянной банке в холодильнике.

Техника: к 1 мл реактива добавляют три капли мочи и сме­шивают. Появление голубой или пурпурной окраски через 3—5 мин указывает на содержание в моче избыточного количества амино­кислот. Возможны артефакты, что бывает при высококонцентриро­ванной моче или при большом содержании в ней аммония

Проба на ацетон в моче. Проводится с помощью таблеток, содержащих нитропруссид натрия. Ацетон и ацетоуксусная кислота в щелочной среде реагируют с нитрозогруппой нитропруссида нат­рия. При этом образуются комплексные анионы красно-коричневого цвета. По цветной шкале определяют количество ацетона в моче. Таблетки для экспресс-анализа мочи на ацетон имеются в наборе завода «Реагент». В набор входит также пипетка, цветная шкала и инструкция

Нитрозонафтоловая проба на тирозинемию. Реактивы:

1)    2,63 н. азотная кислота, для ее приготовления один объем концентрированной азотной кислоты растворяют в 5 объемах воды;

2) 1)   NaN03, 2,5 ã êîòîðîãî ðàñòâîðÿþò â 100 ìë âîäû; 3) à-íèòðîçî- Ð-íàôòîë, 100 ìã êîòîðîãî ðàñòâîðÿþò â 100 ìë 25 % ýòàíîëà. Âñå ðåàêòèâû õðàíÿò â õîëîäèëüíèêå.

Техника: к 1 мл 2,63 н. азотной кислоты добавляют каплю раствора NaN03 и 10 капель раствора а-нитрозо-р-нафтола. После смешивания указанных растворов добавляют три капли мочи и вновь смешивают. О положительном результате говорит оранжево-красное окрашивание, появляющееся в течении 3—5 мин. Такое окраши­вание могут дать только тирозин и его метаболиты, что наблюдается при .недостаточности трансаминазы тирозина и тирозинемии.

Проба на мукополисахариды с толуидиновым синим. Каплю мочи микропипеткой наносят на фильтровальную бумагу, высуши­вают при комнатной температуре, затем погружают в толуидиновый реактив на 1 мин и отмывают в 95 % этаноле. При положительной пробе пятно окрашивается в пурпурно-красный цвет. В качестве контроля параллельно ставят пробу с мочой больного гаргоилизмом или с раствором хондроинтинсульфата А в концентрации 2 мг/мл.

Проба на мукополисахариды с цетилтриметиламмониумброми- дом (ЦТАБ, или цетавлон). Реактивы: 2,5% раствор ЦТАБ в 1 М цитратном буфере, рН 5,75 (перед растворением ЦТАБ буфер подогревают).

Методика приготовления цитратного буфера следующая: 1) рас­творяют 210 г лимонной кислоты (СбНвСЬ-НгО) в 500 мл дистилли­рованной воды; 2) добавляют 150 мл 20 н. NaOH, раствор пере­мешивают и охлаждают до комнатной температуры; 3) исполь­зуя потенциометр, рН раствора доводят до 5,75 при комнатной температуре с добавлением 2 н. NaOH; 4) объем реактива путем добавления дистиллированной воды доводят до 1 л.

Техника: к 5 мл свежей мочи добавляют 1 мл 2,5 % раствора ЦТАБ, смешивают. Проба считается положительной, если в течение 20—30 мин появляется мутный или пушистый преципитат. Реакция бывает положительной при таких мукополисахаридозах, как синдро­мы Hurler, Hunter, Sanfilippo, Scheie, а также при некоторых других наследственных и ненаследственных заболеваниях: синдроме Мар- фана, артро-ониходисплазии, множественных экзостозах, ревматоид­ном артрите, кретинизме и др.

Экспресс-методы выявления наследственных биохимических дефектов

Известно около 500″ наследственных заболеваний обмена ве­ществ, которые могут нарушать нормальный рост и развитие ребен­ка. Диагностика этих заболеваний по внешним клиническим призна­кам не всегда возможна. Программы биохимических исследований для выяснения сущности наследственного дефекта обмена веществ очень сложны, и выполнять их можно лишь в специализированных генетических лабораториях. Однако в детских клинических и поли­клинических лабораториях могут выполняться пробы первого этапа, помогающие врачу «отсеивать» (screening) детей с подозрением на наследственное заболевание обмена веществ. Поэтому такие экспресс-методы называют скринирующими пробами. Это преиму­щественно качественные пробы. Дети с положительными результа­тами по скринирующим пробам обследуются в специализирован­ных лабораториях при медико-генетических консультативных цент­рах по программе второго этапа. Для уточнения характера наслед­ственного дефекта применяются хроматографические методы ана­лиза.

Приводим наиболее часто используемые в практической педиат­рии пробы первого этапа.

Пенетрантность и экспрессивность мультифакториальных за­болеваний во многом зависит от ряда экзогенных причин, что дает основание врачу своевременно организовать профилактику. Так, при выявлении в родословной предрасположенности у ребенка к аллер­гии принимаются меры по исключению контакта с наиболее рас­пространенными аллергенами, в надлежащее время назначаются десенсибилизирующие средства при угрозе аллергической реакции, например перед вакцинацией. В случае появления признаков аллер­гического заболевания проводят аллергологическое обследование.

МЕТОДЫ ГЕНЕТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ В ПЕДИАТРИИ

Генеалогический метод

Исследование родословных является старым испытанным ме­тодом медицинской генетики. С помощью этого метода прослежи­вается распространение признака или наследственной болезни между членами родословной в ряде поколений. Этот метод помогает выявить также наследственное предрасположение к определенным заболе­ваниям, чаще всего наследуемым полигенно. К таким заболеваниям относятся мультифакториальные. В их развитии, кроме наследствен­ного предрасположения, важную роль играют провоцирующие фак­торы: характер питания, переохлаждение, микробная и вирусная инфекция и др. Большинство заболеваний, с которыми встречается в своей практике врач-педиатр (аллергические, инфекционно-аллер- гические, нервной системы типа неврозов, многие психозы, шизо­френия, эпилепсия, заболевания эндокринной системы, сердца, лег­ких, печени, почек, желудочно-кишечного тракта и других систем), относятся к мультифакториальным. Выявление предрасположения к мультифакториальным заболеваниям имеет большое значение для профилактики, ибо помогает выяснить факторы риска и принять меры по их устранению.

Генеалогический метод исследования с составлением и анализом родословных должен широко внедряться в практику врачей-педиат- ров, работающих как в детских стационарах, так и в поликлиниках. Поликлинические карты развития ребенка (как и история болезни в детском стационаре) должны содержать схемы родословных, ко­торые в процессе наблюдения за детьми и обследования родствен­ников необходимо уточнять и дополнять.

Символика, используемая при построении родословных, проста (рис. 14). В родословную важно вносить данные не только о за­болевании с одинаковыми признаками у ряда родственников, но и все другие заболевания, встречающиеся у членов семьи. В практике педиатра почти всегда удается собрать достоверные сведения о заболеваниях в трех поколениях семьи: поколении боль­ного, его братьев и сестер (сибсов), двоюродных братьев и сестер; поколении родителей— матери, отца, дядей и тетей; поколении ба­бушек и дедушек по отцовской и материнской линиям. Больной, от которого начинается исследование, именуется пробандом и обо­значается под соответствующим символом на родословной буквой П. Родословная изображается графически в истории болезни и в поли­клинической карте развития ребенка.

Каждый индивидуум в родословной имеет свой цифровой шифр. Поколения обозначают римскими цифрами сверху вниз, от более старшего к младшим. В пределах поколения слева направо араб­скими цифрами обозначают символы всех индивидуумов. Ниже или на отдельном листе пишут легенду к родословной, в которой соот­ветственно шифру дается краткая характеристика состояния здо­ровья каждого индивидуума и указывается его возраст. Например, II—3 — Мария К., тетя пробанда, 20 лет, здорова; I—2 — бабушка пробанда по линии отца, 60 лет, страдает ревматизмом и т. д.

Для быстрого выяснения распространенности заболеваний в ро­дословной, что особенно ценно при изучении мультифакториальных заболеваний, внутри символов родословной рекомендуется ставить условные буквенные обозначения болезни, чаще первыми буквами названий. Например, ГН — гломерулонефрит, БА — бронхиальная астма, Р — ревматизм, Э — эпилепсия и т. д.

Генеалогический метод позволяет ориентироваться в типе насле­дования признака (заболевания) — аутосомно-доминантный, ауто- сомно-рецессивный, сцепленный с Х-хромосомой, определить частоту и вероятность проявления (пенетрантность) генетически детермини­рованного признака, установить выраженность признака (экспрес­сивность) и другие закономерности.

Так, аутосомно-доминантный тип наследования можно предпо­ложить в тех случаях, когда: 1) заболевание с одинаковой часто­той встречается у мужчин и женщин; 2) отмечается передача заболевания от родителей к сыновьям и дочерям; 3) заболевание прослеживается в поколениях родословной по вертикали; 4) нор­мальные индивидуумы имеют здоровых потомков (рис. 15).

Аутосомно-рецессивному типу наследования присущи: 1) одина­ковая частота рождения больных мужчин и женщин; 2) отсутствие признаков заболевания у родителей; 3) заболевание прослеживается в одном поколении родословной, т. е. по горизонтали (рис. 16).

Рецессивное сцепленное с X- хромосомой наследование ха­рактеризуется Так, аутосомно-доминантный тип наследования можно предпо­ложить в тех случаях, когда: 1) заболевание с одинаковой часто­той встречается у мужчин и женщин; 2) отмечается передача заболевания от родителей к сыновьям и дочерям; 3) заболевание прослеживается в поколениях родословной по вертикали; 4) нор­мальные индивидуумы имеют здоровых потомков (рис. 15).

Аутосомно-рецессивному типу наследования присущи: 1) одина­ковая частота рождения больных мужчин и женщин; 2) отсутствие признаков заболевания у родителей; 3) заболевание прослеживается в одном поколении родословной, т. е. по горизонтали (рис. 16).

Рецессивное сцепленное с X- хромосомой наследование ха­рактеризуется : 1) поражением в семье только мужчин; 2) наличием здоровых сестер у боль­ного при появлении такого за­болевания у половины братьев; 3) отсутствием признаков бо­лезни у родителей; 4) невоз­можностью передачи дефекта от отца сыновьям; 5) наличием больных среди сыновей сестер пробанда или его двоюродных братьев по линии матери.

Принадлежность заболева­ния к мультифакториальным определяется: 1) высокой ча­стотой заболеваний у родствен­ников по сравнению с другими семьями; 2) выраженным кли­ническим полиморфизмом В _{Рис 16} р_{одословная с} рецессивным типом Проявлении заболевания В раз-                                                        наследования фенилкетонурии.

Пенетрантность и экспрессивность мультифакториальных за­болеваний во многом зависит от ряда экзогенных причин, что дает основание врачу своевременно организовать профилактику. Так, при выявлении в родословной предрасположенности у ребенка к аллер­гии принимаются меры по исключению контакта с наиболее рас­пространенными аллергенами, в надлежащее время назначаются десенсибилизирующие средства при угрозе аллергической реакции, например перед вакцинацией. В случае появления признаков аллер­гического заболевания проводят аллергологическое обследование.

Введение лекарственных средств через прямую кишку

При введении через прямую кишку лекарственный препарат не подвергается влиянию ферментов кишечного сока, быстро всасы­вается и в более полной дозе по системе геморроидальных вен через нижнюю полую вену, минуя печень, поступает в общий круг кровообращения. Однако лекарства белковой природы, поли- сахаридные комплексы, жиры из-за отсутствия ферментов в прямой кишке не всасываются стенкой кишки и могут оказать лишь мест­ное влияние.

Детям через прямую кишку вводят свечи и с помощью клизм лекарственные растворы.

Для введения в прямую кишку свечи ребенка укладывают на левый бок с полусогнутыми ногами в коленях и тазо-бедренных суставах и слегка фиксируют в таком положении. Затем левой рукой разводят ягодицы, а правой, освободив тонкий конец конуса свечи, вводят ее в анальное отверстие, придерживая оберточной бумагой утолщенный конец свечи и стараясь протолкнуть ее внутрь. Когда свеча вскальзывает в прямую кишку, важно на 1/2—1 мин задержать ягодицы прижатыми одну к другой, чтобы свеча не была рефлекторно выдавлена обратно.

Лекарственный раствор вводится в прямую кишку после очи­стительной клизмы.